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技術(shù)原理

TMT (Tandem Mass Tag)

TMT試劑由三部分組成：質(zhì)量報(bào)告基團(tuán)、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化基團(tuán)和氨基反應(yīng)基團(tuán)。
        質(zhì)量報(bào)告基團(tuán)有10種不同的分子量，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化基團(tuán)也10有種不同的分子量，與不同的報(bào)告基團(tuán)搭配，能保證被標(biāo)記的不同來源的同一肽段在一級質(zhì)譜中具有相同的質(zhì)荷比；氨基反應(yīng)基團(tuán)能與肽段N端及賴氨酸側(cè)鏈氨基發(fā)生共價(jià)連接使肽段連上標(biāo)記。
        一級質(zhì)譜中，任何一種TMT試劑標(biāo)記的不同樣品中的同一肽段表現(xiàn)出相同的質(zhì)荷比；二級質(zhì)譜中，可切割鍵（箭頭所指）斷裂釋放出TMT報(bào)告離子，在質(zhì)譜低質(zhì)量區(qū)產(chǎn)生了10個(gè)TMT報(bào)告離子峰，其強(qiáng)度反應(yīng)了該肽段在不同樣品中的相對表達(dá)量信息，另外二級質(zhì)譜中的肽段碎片離子峰質(zhì)荷比反應(yīng)了該肽段的序列信息；這些質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)經(jīng)過數(shù)據(jù)庫檢索，可得到蛋白質(zhì)的定性和相對定量信息。

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• 靈敏度高：低豐度蛋白也能檢測出；
• 適用范圍廣：幾乎可對任何物種的各類蛋白質(zhì)進(jìn)行分離鑒定；
• 高通量：能同時(shí)對10組樣本中包含的蛋白進(jìn)行鑒定及表達(dá)差異分析；
• **：液相色譜與串聯(lián)質(zhì)譜連用，自動(dòng)化操作，分析速度快，分離效果好。

• 各種脅迫、生理、病理?xiàng)l件下細(xì)胞、組織樣品中高通量蛋白表達(dá)譜分析
• 各種物種的蛋白質(zhì)組草圖的構(gòu)建